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BL21-CodonPlus 感受態(tài)細(xì)胞

BL21-CodonPlus 感受態(tài)細(xì)胞

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Agilent BL21-CodonPlus 感受態(tài)細(xì)胞通過克服密碼子偏好性,顯著提高蛋白質(zhì)在大腸桿菌中的表達(dá)量。某些密碼子在大腸桿菌中一般極少表達(dá),若使其強(qiáng)制性高表達(dá),就會(huì)導(dǎo)致大腸桿菌內(nèi)部的tRNA庫(kù)被耗竭,從而發(fā)生密碼子偏好性。這種情況通常會(huì)導(dǎo)致蛋白合成減少、多肽鏈提前終止,或表達(dá)蛋白質(zhì)中的氨基酸錯(cuò)誤摻入。BL21-CodonPlus 感受態(tài)細(xì)胞來(lái)源于安捷倫的高性能 BL21-Gold 感受態(tài)細(xì)胞系。這些細(xì)胞能實(shí)現(xiàn)異源蛋白質(zhì)在大腸桿菌中的高效高水平表達(dá)。

克服密碼子偏好性后,無(wú)需進(jìn)行定點(diǎn)突變或在真核生物表達(dá)系統(tǒng)中表達(dá)蛋白,因此節(jié)省了時(shí)間和人力。L21-CodonPlus 感受態(tài)細(xì)胞來(lái)源于 BL21-Gold 細(xì)胞,該細(xì)胞經(jīng)過設(shè)計(jì)含有基因的額外拷貝,這些基因可編碼這些罕見大腸桿菌密碼子的 tRNA。增加這些 tRNA 后,有助于在 BL21-CodonPlus 感受態(tài)細(xì)胞中高水平表達(dá)多種異源重組基因。大腸桿菌中異源蛋白質(zhì)的高效生成常常受到某些 tRNA 稀有性的限制,而這些 tRNA 在產(chǎn)生異源蛋白質(zhì)的有機(jī)體中很豐富。強(qiáng)制性高水平表達(dá)異源蛋白質(zhì)會(huì)耗盡稀有 tRNA 庫(kù),阻礙翻譯。


BL21-CodonPlus 感受態(tài)細(xì)胞還具有安捷倫最高效感受態(tài)細(xì)胞株 XL10-Gold 中存在的 Hte 表型。Hte 表型的存在提高了細(xì)胞的轉(zhuǎn)化效率。此外,編碼核酸內(nèi)切酶 I (endA) 的基因已在這些細(xì)胞中去活,這種酶能夠快速降解由多數(shù) miniprep 步驟分離的質(zhì)粒 DNA。這兩個(gè)特征實(shí)現(xiàn)了多種蛋白質(zhì)表達(dá)構(gòu)造子的直接克隆。
僅限研究使用。不可用于診斷目的。

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