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安捷倫專家為您介紹光譜流式技術(shù)與應(yīng)用
基于實時細胞分析的藥物毒理學(xué)研究與心臟安全性評價
多參數(shù)流式在類器官表型分析、功能鑒定和免疫評價中的應(yīng)用解析
在此次網(wǎng)絡(luò)研討會中,Victor Darley-Usmar 博士將介紹稱為生物能量-代謝物相互作用組的新概念,該概念描述了如何在單個細胞水平上定義生物能量代謝健康。盡管我們知道代謝狀況以及使用能量的方式反映了個體的反應(yīng),但是直到最近,要證明這種關(guān)系同樣適用于人類受試者仍然非常困難。這項研究有趣而令人...
Seahorse XF24 分析儀最初設(shè)計用于附屬于組織培養(yǎng)板的完整細胞。然而,由于許多研究人員通常使用分離線粒體來解釋有關(guān)線粒體功能、生物能量和代謝的基本問題,因此我們開發(fā)出一種方案,將 XF24 分析儀的應(yīng)用擴展至包括分離線粒體。我們成功優(yōu)化了檢測條件以對附著于 XF 測定板底部的分離線粒體的呼...
Mitochondrial functions in bioenergetics and intermediary metabolism are often viewed separately from their role in apoptotic signaling. However, the ...
在氧化磷酸化過程中,底物氧化與 ADP 磷酸化形成 ATP 偶聯(lián)。線粒體泵出質(zhì)子,產(chǎn)生質(zhì)子動力勢,然后質(zhì)子動力勢驅(qū)使質(zhì)子返回通過 ATP 合酶,生成 ATP。但是,一些質(zhì)子會回漏穿過膜,降低偶聯(lián)效率。氧化磷酸化組分的動力學(xué)不同,這取決于基因構(gòu)成、信號通路、氧化應(yīng)激和疾病,或者藥物或毒性化合物的應(yīng)用。...
最近的發(fā)現(xiàn)已經(jīng)將線粒體功能障礙和細胞生物能量缺陷與包括肥胖、糖尿病、癌癥、心肌癥和神經(jīng)退行性疾病在內(nèi)的許多疾病的病理生理學(xué)聯(lián)系起來。細胞外通量 (XF) 技術(shù)的推出使活細胞中細胞生物能量和線粒體功能的無創(chuàng)、實時分析成為可能,為研究這些疾病提供了一種新的手段。
一種非常有用且直接的方法是依次添加 ATP 合成酶(寡霉素)抑制劑、解聯(lián)劑 (FCCP) 和呼吸鏈抑制劑(抗霉素或魚藤酮),以便在基礎(chǔ)和壓力條件下獲得細胞的線粒體特性。
XF 體外代謝流技術(shù)通常用于測量細胞能量代謝,以及檢測代謝在調(diào)節(jié)細胞表型中的作用。從測量基礎(chǔ)胞內(nèi)線粒體功能起,現(xiàn)在 XF 分析發(fā)展為能夠應(yīng)用多種檢測測量線粒體底物選擇性和糖酵解。此外,XF 分析儀還可用于測量分離線粒體的功能,可同時檢查多個樣品的線粒體,節(jié)省寶貴的時間和資源。
糖酵解與大量正常生理過程(干細胞多能性、獲得性免疫響應(yīng)、肌肉功能、腦功能)以及一些病理生理過程(腫瘤形成)相關(guān)。糖酵解包括一系列生化反應(yīng),可將葡萄糖轉(zhuǎn)化成乳酸,同時產(chǎn)生 ATP 和凈余的質(zhì)子。隨著糖酵解的發(fā)生,培養(yǎng)的細胞會釋放質(zhì)子,并酸化培養(yǎng)基。Seahorse XF 細胞外流量分析儀實時檢測細胞周...
質(zhì)膜透化可控制底物供應(yīng),有效避免線粒體分離的需要,在研究遺傳修飾細胞時,或可用的生物樣品有限時特別有用。已有多種方法用于哺乳動物細胞的透化,但是最近對細菌細胞溶解素的研究證明使用該方法可透化多種細胞單層用于 XF 分析。